مطالعه ی کربوهیدرازها و پروتئازهای گوارشی لاروهای مگس زیتون bacterocera oleae gmelin با تغذیه از ارقام مختلف زیتون

در این پژوهش، ویژگی های بیوشیمیایی آلفا-آمیلاز، گلوکوزیداز ها، پروتئازها، تاثیر تغذیه از رقم های مختلف زیتون و تاثیر مهارکننده پروتئینی بر فعالیت آلفا-آمیلاز گوارشی (bactrocera oleae gmelin (diptera:tephritidae مورد بررسی قرار گرفت. اسیدیته و دمای بهینه ی فعالیت آمیلولیتیکی در لوله ی گوارش لارو مگس به ترتیب 5 و 45-20 درجه ی سلسیوس تعیین شد. از میان یون ها و بازدارنده های اختصاصی استفاده شده؛ کلسیم، pmsf و egta به طور معنی داری بر فعالیت آمیلولیتیکی تاثیر داشتند که نشان دهنده ی حضور بنیان اسیدآمینه های سه تایی (سرین، هستیدین و اسید آسپارتیک) و یون کلسیم در مکان فعال آنزیم است. فعالیت گلوکوزیداز ها نیز در فرکشن محلول بیشتر از فرکشن متصل به غشاء بود که فعالیت ویژه ی آلفا و بتا- گلوکوزیداز به ترتیب 225/0 و 067/0 واحد آنزیمی بر میلی گرم پروتئین بدست آمد. اسیدیته ی بهینه ی آلفا و بتا- گلوکوزیداز به ترتیب 6-5 و 5، دمای بهینه ی نیز به ترتیب 45 و 25 درجه ی سلسیوس تعیین شد. یون های کلسیم، مس، آهن، سدیم و فعالیت آلفا- گلوکوزیداز را به طور معنی داری افزایش دادند اما یون های پتاسیم و منیزیم تاثیر معکوس داشتند. یون های مس، منیزیم، روی، پتاسیم و سدیم فعالیت بتا- گلوکوزیداز را افزایش دادند اما سایر یون ها منجر به کاهش فعالیت آنزیمی در لوله ی گوارش لاروها شدند. از میان بازدارنده های اختصاصی، phenanthrolin و dtc فعالیت آلفا- گلوکوزیداز و egta ، phenanthroline و edta فعالیت بتا- گلوکوزیداز را کاهش دادند. اسیدیته بهینه ی فعالیت پروتئازی کل برای فرکشن های محلول و متصل به غشاء به ترتیب 4 و 10 و دمای بهینه ی فعالیت آنزیمی به ترتیب 25 و 25 درجه سلسیوس بدست آمد. با استفاده از سوبستراها و بازدارنده های اختصاصی وجود سرین پروتئینازها، سیستئین پروتئینازها و اگزوپپتیدازها در لوله ی گوارش لارو اثبات شد. تغذیه لاروها روی رقم های میوه ی زیتون نشان داد که بیش ترین و کم ترین فعالیت آلفا- آمیلاز به ترتیب در لارو های تغذیه شده از رقم های آربکین و ماری، بیش ترین فعالیت آلفا و بتا- گلوکوزیداز به ترتیب در لارو های تغذیه شده از رقم های فرانگیونتو و فیشمی، کم ترین فعالیت آلفا-گلوکوزیداز در لارو های تغذیه شده از رقم های آمیگدالیفولیا، زرد و کنسروالیا و کم ترین فعالیت بتا- گلوکوزیداز در لارو های تغذیه شده از رقم های زرد، کالاماتا و آربکین بود. بیش ترین فعالیت تریپسین، کیمو-تریپسین، الاستاز، کاتپسین b، کاتپسین l و کاتپسین d به ترتیب روی رقم های آمیگدالیفولیا، کراتینا، بلیدی، ماری، کنسروالیا، بلیدی و آربکین وکم ترین فعالیت به ترتیب روی رقم های روغنی- کالاماتا، زرد، مانزانیلا، کالاماتا، کراتینا- کنسروالیا- کالاماتا و روغنی مشاهده شد. نتایج نشان دادند که عصاره ی پروتئینی علف هفت بند اثر مهارکنندگی روی آلفا- آمیلاز دارد و مقدار ic50 آن 062/0 میلی گرم بر میلی لیتر برآورد شد. نتایج این پژوهش حضور آنزیم های گوارشی آلفا- آمیلاز، گلوکوزیداز ها و پروتئاز ها را در لوله ی گوارش لارو مگس نشان دادند. همچنین تغذیه روی ارقام مختلف زیتون بر فعالیت آنزیم های گوارشی اثر داشت.